MicroRNA-182調控Sirt1誘導的糖尿病角膜神經再生

題目：microRNA-182 Mediates Sirt1-Induced Diabetic Corneal Nerve Regeneration

雜志：Diabetes        IF：9.337

摘要：糖尿病人常伴隨糖尿病性角膜病的發生，主要是由神經損傷和角膜敏感性的降低引起。已有研究證明Sirt1在中樞 神經系統中起到神經保護的作用，過表達Sirt1會促進角膜損傷修復的進程。然而，Sirt1的具體作用機制仍不清楚。本文主要針對Sirt1的作用機制進行研究，闡述了Sirt1/ miR-182在神經再生方面的作用。

技術路線 

      1.高通量篩選第一步：miRNA表達譜

結膜下注射使小鼠過表達Sirt1，然后檢測miRNA表達譜，發現miR-182表達明顯上調。已有文獻報道miR-182是感覺神經元特異性的miRNA且參與視網膜病的發生。因此作者認為miR-182是Sirt1的下游靶點，并對它進行接下來的研究。

      2.高通量篩選第二步：PCR芯片

在進一步的研究中，文章想要探究miR-182的靶基因。首先利用生物信息學軟件預測發現：miR-182的很多靶基因都屬于氧化應激和抗氧化壓力通路相關基因。為了進一步得到這個信號通路中基因在糖尿病中的表達變化，文章用氧化應激和抗氧化PCR芯片檢測相關基因的表達，發現NOX4在糖尿病小鼠中明顯上調。暗示NOX4在糖尿病神經損傷方面發揮關鍵的調控作用。 

3.必不可少的功能研究

在利用高通量技術篩選到Sirt1的靶基因miR-182后，功能實驗證明miR-182能夠促進神經細胞生長及損傷后的再生。當利用PCR芯片尋找到差異明顯的miR-182靶基因－NOX4后，功能實驗也驗證NOX4會抑 制miR-182誘導的神經再生的進程。

小結：

高通量檢測不僅可以研究疾病發生中的關鍵分子，還可以如本文一樣，在已知蛋白生物功能的基礎上篩選其下游靶基因進行分子機制研究。本文在已知功能的基礎上，通過miRNA高通量檢測篩選出下游靶標miR-182, 然后利用PCR芯片快速篩選出miR-182靶基因－NOX4。文章思路清晰，環環相扣，對功能機制的研究非常具有借鑒意義。

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