文章導讀:
在非編碼RNA的大家族中,環狀RNA是近年來繼microRNA和lncRNA之后又一個明星成員。因其3’-5’端成環,所以在生物體中具有穩定性高,不易被降解的特性。大部分環狀RNA通過直接或間接調控miRNA和靶基因參與海綿機制,現已有多篇文章報道該機制在疾病的發生 發展過程中起至關重要的作用。另外,環狀RNA在疾病組織中通常差異性表達,因此,十分適合做為ai癥的分子標志物來研究。目前關于直腸ai轉移肝ai領域還沒有相關報道。本文通過環狀RNA測序手段,對比直腸ai患者(CRC)與直腸ai轉移為肝ai患者(CRC-m)組織樣本,成功構建了直腸ai轉移為肝ai的環狀RNA表達譜。通過擴大樣本量,證實兩個差異上調的環狀RNA,分別為circRNA_0001178和circRNA_0000826,它們具備作為分子標志物研究的臨床價值。分別構建了環狀RNA-miRNA-mRNA網絡圖,直觀的展示了三者間潛在的關系。
相關信息:
期刊:Molecular Cancer
影響因子:41.44
服務內容:環狀RNA測序(云序生物提供)
發表時間:2019年1月
測序樣本:1. 直腸ai患者(CRC)和直腸ai轉移為肝ai患者(CRC-m)ai組織,樣本量:3 vs 3
驗證樣本:2. 直腸ai患者(CRC)和直腸ai轉移為肝ai患者(CRC-m)ai組織,樣本量:24 vs 16
文章內容:
1. 全轉錄組測序構建環狀RNA表達譜
作者通過高通量測序技術,分別檢測了CRC和CRC-m患者ai組織中環狀RNA的表達,共檢測到66,855個環狀RNA(差異倍數≥2倍,P值≤0.05),其中92個環狀RNA差異上調,21個環狀RNA差異下調。差異表達的環狀RNA,大多是外顯子成環的且可能具備編碼蛋白的能力。同時,它們除了在Y染色體上不分布以外,在其他染色體上都有分布。
2. 環狀RNA定量PCR驗證表達量
作者選取前4名差異上調的環狀RNA,擴大樣本至40例,進行環狀RNA定量PCR(云序生物提供),驗證結果與測序結果的趨勢一致,說明測序結果真實可靠。其中,2個環狀:circRNA_0001178和circRNA_0000826為差異高表達。ROC曲線證實這2個環狀的表達情況與臨床診斷結果關系密切,具有作為直腸ai轉移肝ai臨床診斷的潛力。
3. 構建環狀RNA-miRNA-mRNA網絡圖
通過Cytoscape軟件,作者對這兩個環狀分別構建了ceRNA網絡圖。首先,確定與circRNA_0001178或circRNA_0000826結合力較強的5個miRNA,接著預測與miRNA結合的靶基因,構建成ceRNA網絡圖。